1 材料与方法

1． 1 调查对象

采用分层随机抽样方法，在全市登记在册的一、二、三级医疗机构、疾控中心、企事业单位以及专业检测机构所设的二级病原微生物实验室中，随机抽取 15% 进行调查。

1． 2 调查方法

现场调查部分采用统一的调查表和调查程序，由卫生监督员现场提问实验室负责人和监督检查相结合的方式获取调查结果。现场检测部分则采用对全市各区县卫生监督所公开招标的方式选择 6 个有开展检测能力和资格的单位承担，通过直接测定和委托送检相结合的方式获得检测结果。全部参与调查和检测的人员均经过专项的生物安全知识以及专业检测技术的培训，采用规范的报告格式上报调查资料。调查资料采用 EpiData 软件录入，用 Excel 分析。

1． 3 调查内容

1． 3． 1 实验室调查 主要通过二级病原微生物实验室中生物安全柜的安装情况、使用频率、操作 SOP、操作人员素质、消毒方法、消毒频率等项目对目前本市二级生物安全柜合理安全使用的现状进行调查。同时随机对生物安全柜操作人员的培训状况、正确使用个人防护用品的了解程度以及对使用生物安全柜的依从性进行调查。通过调查对本市实验室生物安全柜安全使用现状进行整体评估和分析。

1． 3． 2 现场检测 通过对实验室使用中的生物安全柜垂直气流速度、工作窗口进风风速、噪声、烟雾实验、紫外线灯强度、操作面细菌总数和金黄色葡萄球菌等指标进行测定，掌握二级病原微生物实验室生物安全柜性能状况和细菌污染程度。

2 结果

2． 1 基本情况

2． 1． 1 实验室调查 本次共调查了 84 家二级实验室，抽样率为 15%。医疗机构实验室 68 家( 其中一级医院 9家，二级医院 32 家，三级医院 13 家，民营医院 14 家) ，区级疾控中心实验室 5 家，企业实验室 8 家，专业检测机构实验室 3 家( 表 1) 。

2． 1． 2 现场抽检 本次抽检共对 75 个二级病原微生物实验的 90 个生物安全柜的安全性能进行了监督采样，占备案实验室总数的 13%，这些实验室分布于 65 家医疗机构，其中三级医院 15 家，二级医院 23 家，一级医院 11家，民营医院 16 家，此外还有 10 家非医疗机构单位。

2． 2 生物安全柜安装情况

50% 的实验室生物安全柜靠近窗户安装而且安装距离 ＜1 m，其中 60% 的实验室窗户始终关闭，24% 的实验室在使用安全柜时将窗户关闭，还有 16% 的实验室在使用安全柜时有可能将窗户打开; 14% 的实验室生物安全柜靠门安装，且距离 ＜1 m; 7%的实验室生物安全柜安装在风扇或空调风口下; 19% 的实验室生物安全柜所在房间的空调通风系统与其他房间共用; 41% 的实验室生物安全柜安装后未进行安全性能检测。

2． 3 使用情况

40%的实验室每周使用生物安全柜的次数在 3 次及以下; 85%的实验室是由固定的实验人员进行生物安全柜内的实验操作; 80% 的调查实验室制定了生物安全柜合理安全使用的 SOP; 75% 的实验室对生物安全柜的每次使用情况、清洗消毒情况进行记录; 在使用生物安全柜超过 1 年的实验室中，仅有 31% 的实验室对该生物安全柜进行了生物安全性能测定。

2． 4 清洗消毒情况

17%的实验室仅对生物安全柜的台面进行清洗消毒，而忽略了生物安全柜内侧面的清洗消毒工作; 69% 的实验室使用含氯消毒剂，26% 的实验室使用 75% 的酒精对生物安全柜进行擦拭消毒; 80% 的实验室每天使用后对生物安全柜进行清洗消毒; 75% 的实验室对生物安全柜内用于消毒的紫外线灯定期进行照射强度的监测。

2． 5 人员情况

调查的 84 家二级实验室中，拥有高级职称检验人员的占 36%，只有初级职称检验人员的占 18%; 固定操作生物安全柜的人员中，中级及以上职称操作人员仅占36%。现场在各实验室抽查了 153 名在生物安全柜进行实验活动的人员，其中 89% 上岗前接受了各种形式的生物安全柜知识的培训; 94% 的操作人员了解进行实验活动时应佩戴个人防护用品; 32% 的实验操作人员认为在生物安全柜内进行实验操作对保护实验人员有帮助，但比较麻烦会降低工作效率; 65% 的操作人员认为使用生物安全柜进行实验能保护实验人员，而且操作很方便;3%的人认为生物安全柜对实验人员的保护作用无所谓。

2． 6 抽检情况

抽检的 90 台生物安全柜中，有 17 台垂直气流速度不符合要求，10 台工作窗口进风风速不符合要求，其余检测项目全部合格。

2． 7 不同医疗机构实验室比较

在生物安全柜的安装、使用、清洗消毒、操作人员情况四个方面选取五个关键性指标对不同级别类型的医疗机构二级病原微生物实验室的生物安全情况进行两两比较，差异均有统计学意义( P ＜0．05) ( 表2) 。

2． 8 医疗机构与非医疗机构实验室比较

非医疗机构实验室的总体情况要比医疗机构实验室略好( 表 3) 。

3 讨论

3． 1 加强实验室生物安全柜的规范使用

合理规范地使用生物安全柜是确保二级病原微生物实验室生物安全，防止实验室感染的关键。自 SARS 以来，国务院颁布了《病原微生物实验室生物安全管理条例》，此外还发布了一系列实验室生物安全的标准规范，要求二级病原微生物实验室必须配备生物安全柜。本市2006 年开展实验室备案工作，要求必须配备生物安全柜才符合二级病原微生物实验室备案申请条件。但实验室使用生物安全柜的时间不长，对生物安全柜的工作原理、操作技术认识不充足，调查中发现实验室在使用生物安全柜方面存在着各种各样不规范的情况。例如在近距离开着窗户、空调、风扇进行生物安全柜操作，破坏生物安全柜的定向气流; 生物安全柜长期使用不进行性能维护和检测，生物安全柜的气密性以及风机、高效过滤膜性能降低; 使用后不及时消毒、消毒方法不正确、消毒效果不监测等等。这些不规范的使用，致使生物安全柜无法发挥正常的过滤、排出气溶胶，防止发生病原微生物污染的作用，反而变成实验室中的一个污染源。因此，实验室管理部门以及技术指导部门必须加强对生物安全柜使用技术规范的培训，明确生物安全柜的工作原理、使用注意要点、消毒方法、检测维护频率等内容。

3． 2 进一步提高实验室操作人员总体水平

实验室工作人员对生物安全柜的认知水平以及技术水平在实验室生物安全规范管理中起重要作用。调查中发现，本市实验室工作人员总体水平比较低，拥有高级职称工作人员的实验室仅占调查实验室的1/3，操作生物安全柜的实验室工作人员中，中级及以上职称的也仅占1/3，并且大多数分布在二、三级医疗机构的实验室。实验室工作人员对使用生物安全柜，防止实验室感染的依从性比较差。有相当部分实验室工作人员认为使用生物安全柜比较麻烦，甚至认为以前没有用生物安全柜进行病原微生物的检测工作也没有发生实验室感染，从而造成对规范使用生物安全柜重视程度不高，对严格按照标准操作程序在生物安全柜内进行实验活动的自觉性不高。因此，实验室一方面应该根据《实验室生物安全通用要求》等技术标准的要求，从技术层面定期组织实验室工作人员学习生物安全柜的工作原理、规范使用、消毒隔离方法等生物安全防护知识; 另一方面应进一步强调生物安全柜的合理规范使用对二级病原微生物实验室生物安全防护的重要作用，切实提高工作人员的认识水平和技术能力。

3． 3 完善病原微生物实验室卫生检测标准

目前，我国没有专门的病原微生物实验室卫生检测标准，本次检测的方法和评价结果主要参照的是《医院消毒卫生标准》中化验室的标准和行业标准《生物安全柜》。而在实际运用中主要存在以下三方面的问题: 第一，《医院消毒卫生标准》中化验室的空气、物体表面以及工作人员手的卫生标准都比较笼统，没有细分清洁区、半污染区以及污染区的不同要求，并且该标准制定时未考虑生物安全柜对于降低实验室气溶胶污染的因素，因此难以利用该标准评价生物安全柜正常工作下实验室污染区被实验活动污染的情况。第二，《医院消毒卫生标准》只适用于医疗机构的实验室，对于非医疗机构实验室污染情况的监测无法适用该标准。第三，生物安全柜的标准是行业标准，不具有强制性，对于生物安全柜性能不符合标准的实验室无法采取强制手段要求其进行生物安全柜的维护管理，不利于监管工作的开展。