ICR 远交系小鼠引自日本国立肿瘤研究所, 属瑞 士种。该鼠具有繁殖水平高、生产周期短、生长发育 快、体型适中、对环境及饲喂适应性强等特点, 广泛应 用于药物评价、毒性试验和生物医学研究等领域。随 着生命科学的不断发展, 对实验动物提出了高标准严 要求, 普通级实验动物只能用于教学或预实验, 科研用 小鼠和大鼠必须达到清洁级( 排除动物传染病病原体 和对实验干扰的病原体) 。青海省实验动物中心为满 足省内需要, 于 2002年由上海实验动物种子中心引进 SPF( 无特定病原体) 级 ICR小鼠, 降为清洁级饲养在屏 障系统中, 至今生产供应的数量达 10 万余只, 是目前 用量最多的一种标准化清洁级实验动物。在保种和繁 育生产过程中, ICR小鼠的微生物质量控制十分重要, 我们在 2005—2006年间, 在超净工作台内进行了剖腹 产净化 ICR小 鼠的实验, 结合生物净化层流柜饲养技 术, 有效地提高和保证了小鼠 微生物质量, 特别是在 动物种群受细菌、病毒、寄生虫污染时立即全 部淘汰, 及时挽救、补充和重新建立SPF 级种群, 避免反复引种 造 成人力、时间、物力及财力的损失和浪费, 同时避免 运输过程中的污 染, 结果表明使用本途径是维护和建 立SPF 级 ICR 小鼠群种群唯一经济有效的 办法, 填补 了青海省实验动物净化工作空白, 为提高我省实验动 物质量 奠定基础, 缩短与先进省市的差距。现将结果 报告如下: 

1　材料和方法 

1. 1　实验室和设备　清洁级动物实验室、超净工作 台、生物净化层流柜、隔水式恒温水浴锅、手术器械、消 毒缸等。 实验室经 2%过氧乙酸喷雾消毒, 开启空气净化 系统, 在静态情况下运转 2d。手术前 lh 开启超净工作 台紫外线灯, 开启生物净化层流柜后一直保持于工作状态。手术器械、止血纱布棉球等物品经 121℃ , 35min 高压蒸汽灭菌。 

1. 2 　保姆 ICR小鼠　为 2002 年从上海实验动物种子 中心引进的 SPF 级 ICR小鼠, 合格证号: NO 0024361, 交配时间比剖腹产 ICR小鼠提前 3～ 4d。 

1. 3 　剖腹的 ICR 小鼠　来自本中心普通级 ICR小鼠, 饲养于普通环境, 交配时间比 SPF 级 ICR 小鼠延迟 3 ～ 4 d, 交配后第 2d 提出雄鼠, 雌鼠单独饲养。 

1. 4 　剖腹取仔方法　到预产期的孕鼠( 交配后 20 d) , 断颈椎处死后, 立即用 2%过氧乙酸浸泡 2～ 3s, 然后 置于超净工作台固定、剖腹, 用无菌止血钳夹住近肛门 的子宫颈, 再用无菌剪从止血钳的肛门一侧剪断子宫, 取出子宫后, 置 2%过氧乙酸浸泡 1 ～ 2s, 快速切开子 宫, 取出幼仔, 用无菌纱布将幼仔全身擦试干净, 擦去 口、鼻部的羊膜、羊水, 切断脐带, 至体色由紫色转为鲜 红色, 能够自由呼吸为止〔1, 2〕 。 

1. 5 　代乳　在剖腹产所得的活幼仔中, 每只孕鼠的幼 仔取 6～ 8 只, 用无菌运输盒转入生物净化层流柜中, 用SPF 级 ICR小鼠保姆代乳, 21d 离乳, 然后将保姆鼠 移出层流柜处死。 

1. 6 　微生物检测　在 1月龄和 2 月龄时, 随机抽取剖 腹产小鼠按SPF 级动物质量标准进行微生物和寄生虫 检测, 以后每季度检测一次。

 2　结果 

2. 1　剖腹净化到扩大生产　此次剖腹净化 ICR小鼠 共繁育成功 20 只孕鼠, 成活幼仔 120 只, 目前扩大成 ♀种 180 只, ♂种 90只的生产种群, 月供600～ 900 只, 生长繁育状况正常。 

2. 2　质量检测结果　按照实验动物国家标准要求, SPF 级动物应排除的病毒 6 种: 小鼠肺炎病毒、呼肠孤 病毒、大鼠细小病毒 RV 株、大鼠细小病毒 H-1 株、大鼠冠状病毒/大鼠泪眼腺病毒; 细菌 4 种: 嗜肺巴氏杆 菌、肺炎克雷伯杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌; 寄生 虫2 种: 鞭毛虫、纤毛虫〔3〕 。经实验室检测, 病毒、细 菌、寄生虫均为阴性, 符合我国 SPF 级动物质量标 准〔3〕 。 

3　讨论 

3. 1 　应用超净工作台和生物净化层流柜, 在开放环境 中实施子宫摘除术净化小鼠, 能够建立和维护 SPF 级 实验动物种群。由于超净工作台、生物净化层流柜的 体积小、耗能低、易维护, 投入少量资金就能开展实验 动物净化工作, 此项技术的应用, 避免了资金浪费, 减 少反复引种和运输的污染, 最终解决就地开展实验动 物净化的难题, 该项技术已应用到实验动物中心的实 际工作中, 收到良好效果。

3. 2　由于环境条件是保证实验动物质量的关键, 因 此, 首先对静态状态下设备内外环境进行检测, 制定合 理有效的微生物寄生虫控制措施和剖腹产无菌操作规 程, 并且定期抽检动物的微生物和寄生虫指标。通过 实验观察还发现, 由于青海气候干燥, 饲养环境湿度为 30% , 可以通过使用加湿器使湿度达到规定的 40% , 是实际工作中应引起注意的一个问题。